寬場熒光顯微鏡可以通過選擇多通濾光片實(shí)現(xiàn)同時(shí)顯示多個(gè)熒光,比如*典型的就是FISH應(yīng)用中的藍(lán)綠雙通濾光片雙通B/G:EX:470/40&575/35;EM:525/40&625/60
一般濾光片是單EX激發(fā)、單EM發(fā)射,這種可以做到兩個(gè)EX激發(fā),兩個(gè)EM發(fā)射,而且都是帶通,所以成像效果也會(huì)比較好。
如果選擇長通或短通,理論上也可能形成多色,但成像可能會(huì)有更多雜色,不干凈。更切實(shí)的是多個(gè)單通輪流切換,分別成像然后疊加得出多色的熒光,效果更好。
以上都是寬光譜的光源(汞燈或?qū)捁庾VLED光源)+傳統(tǒng)轉(zhuǎn)盤濾光片熒光顯微鏡的時(shí)代。
現(xiàn)在,還有其他思路,比如光源不做寬光譜,做窄帶激發(fā),簡化濾光片組結(jié)構(gòu);通過ML或者說AI訓(xùn)練,讓軟件處理成想要的成像效果;通過相機(jī)內(nèi)置濾光片進(jìn)行拆分,高速電動(dòng)切換做到快速多色熒光成像……