顯微鏡資訊:帶電粒子的基本精確測量值-生物實驗顯微鏡
帶電粒子的基本精確測量值-生物實驗顯微鏡
不同pH下兩性金屬離子的電荷分布狀況
以蛋白質(zhì)為例,表明蛋白質(zhì)是具有正電荷和負電荷的兩性分子,其凈電荷取決于溶液的pH,即取決于分子中氨基和羧基的電離度。偏光顯微鏡用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。這種顯微鏡的載物臺是可以旋轉(zhuǎn)的,當載物臺上放入單折射的物質(zhì)時,無論如何旋轉(zhuǎn)載物臺,由于兩個偏振片是垂直的,顯微鏡里看不到光線,而放入雙折射性物質(zhì)時,由于光線通過這類物質(zhì)時發(fā)生偏轉(zhuǎn),因此旋轉(zhuǎn)載物臺便能檢測到這種物體。熒光顯微鏡以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學物質(zhì)的分布及定位等。體視顯微鏡一臺儀器。指從不同角度觀察物體,使雙眼引起立體感覺的雙目顯微鏡。 在低pH下,游離羧基不離子化,而氨基將以正電荷質(zhì)子化,因此整個蛋白質(zhì)分子的凈電荷值將由兩個帶電基團的相對比率確定。 相反,在高pH下,游離羧基將離子化,而氨基將不質(zhì)子化,結(jié)果,整個分子將帶負電。 如果pH接近中性,則一些游離側(cè)鏈基團是質(zhì)子化還是處于電中性狀態(tài)取決于它們各自的pK。 如果pH平衡蛋白質(zhì)分子正電荷和負電荷,則蛋白質(zhì)分子的凈電荷為零。 這個pH叫做蛋白質(zhì)
雖然可以精確測量帶電粒子的基本遷移,但這種方法在當時是困難的,可以作為一種常規(guī)的分析工具。為了降低擴散效應(yīng),逐漸采用凝膠作為液相支撐介質(zhì)。通常使用聚丙烯酰胺凝膠電泳或瓊脂糖凝膠,這取決于要分離的分子的性質(zhì)。早期的電泳系統(tǒng)以淀粉凝膠為介質(zhì)。大多數(shù)現(xiàn)在被聚丙烯酰胺或瓊脂凝膠取代,由于他們更高的分辨率和處理能力。