顯微鏡資訊:細胞懸液的純度分辨率-細胞分選和記錄生物顯微鏡
細胞懸液的純度分辨率-細胞分選和記錄生物顯微鏡
細胞懸液純度
細胞分選流式細胞術(shù)應(yīng)區(qū)別于細胞分析。體視顯微鏡一臺儀器。指從不同角度觀察物體,使雙眼引起立體感覺的雙目顯微鏡。生物顯微鏡用來觀察生物切片、生物細胞、細菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究,同時可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細小顆粒等物體。左圖所示為生產(chǎn)的倒置生物顯微鏡型,該生物顯微鏡也是食品廠、飲用水廠辦QS、HACCP認證的必備檢驗設(shè)備。熒光顯微鏡以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。從電子學(xué)的角度來看,雖然分選流式細胞術(shù)比較復(fù)雜,但它的主要功能是制備分選細胞,因此在靈敏度和分辨率方面不應(yīng)要求它。
在細胞分選過程中,所選細胞懸液的純度將直接影響細胞的分選指標(biāo)。 所有上述方法都可以用于細胞分選。 然而,應(yīng)當(dāng)注意的是,只有少數(shù)可以被活細胞分選。 這方面還需要進一步的研究和探索,才能得到發(fā)展。 在細胞分選中應(yīng)當(dāng)解決更多的技術(shù)限制,首先,包含分選的細胞的液滴的間隔超過鞘液的中空液滴的間隔的15倍,這意味著細胞將被大大稀釋。 通常細胞需要進一步濃縮,導(dǎo)致不可避免的損失。
提高細胞分析速度將大大降低制備樣品的純度。制造商提供的噴嘴流量被認為是獲得良好制備結(jié)果的*佳選擇,并且一般認為流量不超過每秒5000個電池。每秒少于2000個單元的流速被認為是更有效的。這個速率適用于所有可以通過孔口流動的細胞。分選細胞的實際恢復(fù)率取決于要分選的細胞和要移除的細胞之間的比率,因為計算機也一直在處理準(zhǔn)確的細胞信息。事實上,低頻率的1:15含細胞的液滴可以避免這個問題。從統(tǒng)計學(xué)上降低鞘液包含兩個細胞的概率。
分選一個細胞達到所需數(shù)量需要較長的分選周期,無形中增加了以下潛在危險:細胞裂解碎片增多,細胞聚集,異物產(chǎn)生堵塞噴嘴,甚至導(dǎo)致噴嘴流量的改變。這是細胞流失和純度下降的*重要原因。
上述方法學(xué)的所有企業(yè)過失行為都是可以根據(jù)需要我們的經(jīng)驗總結(jié)出的。流式細胞分析信息技術(shù)和細胞分選系統(tǒng)技術(shù)正以它的先進性而被越來越多的科學(xué)家所認識。